O que é uma citocentrífuga e noções básicas de uso

Neste artigo O que é uma citocentrífuga e noções básicas de uso, vamos abordar para que é utilizado este equipamento de laboratório e passar noções básicas de como utiliza-la.

Primeiramente, uma citocentrífuga é uma centrífuga com um rotor especial, para uso de funis e tem como objetivo preparar lâminas de amostras que contenham células, para posterior análise por microscópio.

Logo depois da  centrifugação, uma mono camada de células é produzida numa área determinada da lâmina de vidro, por meio da força centrífuga.

A citocentrífuga é imprescindível em casos em que as amostras não possuem uma grande quantidade de células, ao contrário do sangue em que uma simples distensão na lâmina já é o suficiente para visualização de células.

No entanto, o principal requisito é que a amostra seja uma suspensão de células frescas e intactas para serem avaliadas por um microscópio. Se a suspensão de células estiver muito diluída, não haverá muitas células na lâmina após a centrifugação, ao contrário, se a suspensão estiver muito concentrada as células tendem a se agrupar, o que dificultará a visualização no microscópio.

Seguem os itens necessários:

• Citocentrífuga Sigma 2-7 Cyto
• Lâminas de vidro
• Papel filtro
• Clipe para lâmina
• Câmara para amostra ou Citofunil
• Pipetas

A Citocentrífuga Sigma 2-7 Cyto já vem com 12 Clipes em aço inoxidável Tipo 302, 50 câmaras para amostra descartável (citofunil), com filtro e 50 lâminas revestidas.

Etapas básicas de uso para citocentrifugação:

1. Coloque a identificação na lâmina referente à amostra
2. Monte o conjunto: lâmina, filtro , citofunil e trave bem o clipe.

Obs: a parte mais plana do filtro deve ser colocada virada para a lâmina

3. Homogenize a amostra com um agitador de tubos vórtex em uma velocidade baixa, por mais ou menos 35 a 45 segundos e então pipete o volume de amostra na câmara e coloque no citofunil. O volume a ser pipetado depende da densidade da amostra.

Obs: Se for utilizar amostras diferentes em uma mesma centrifugação, utilize uma ponteira da pipeta para cada amostra. Após a pipetagem de uma amostra, descarte a ponteira e pegue uma nova, para a amostra seguinte.

4. Centrifugue de acordo com o tipo de célula da sua amostra ou protocolo seguido (Por exemplo: 1.500 rpm por 1 min)
5. Remova a lâmina e espere secar
6. Faça a coloração desejada e faça sua análise no microscópio.

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